論文分享｜基于MGC系列揭示環(huán)境鎂離子對副溶血性弧菌毒力與生物膜形成的全局調控

發(fā)布時間：2025-01-17　來源：新芝生物　瀏覽量：0

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研究摘要

　　副溶血性弧菌是一種廣泛存在于海洋生態(tài)系統(tǒng)中的細菌，常引起人類急性胃腸炎。鎂離子作為海水中第二豐富的金屬陽離子，對副溶血性弧菌的生長和基因表達至關重要。盡管如此，關于鎂離子如何具體影響副溶血性弧菌生理特性的詳細機制仍不明確。通過RNA測序分析，研究團隊發(fā)現(xiàn)共有1494個基因受到鎂離子的顯著調控。其中與側鞭毛、胞外多糖、Ⅲ型分泌系統(tǒng)2、VI型分泌系統(tǒng)(T6SS)1、T6SS2和耐熱直接溶血素相關的基因大部分被下調。此外，18個可能參與c-di-GMP代謝的基因和八十多個編碼假定調節(jié)因子的基因也存在顯著差異表達。這些結果表明，副溶血性弧菌對鎂離子脅迫的適應過程可能受到復雜調控網(wǎng)絡的嚴格調控。鎂離子促進了副溶血弧菌的增殖速度、游泳運動能力和細胞黏附能力，但抑制了其群集運動能力、生物膜形成能力和c-di-GMP生成能力，而對莢膜多糖生成能力和對HeLa細胞的細胞毒性沒有顯著影響。這些發(fā)現(xiàn)揭示了鎂離子對副溶血弧菌生理特性和基因表達的綜合影響。

MGC系列微生物生長曲線分析儀的應用

　　為了評估不同濃度鎂離子對副溶血性弧菌生長的影響，研究團隊使用了MGC-200微生物生長曲線分析儀。實驗中，副溶血性弧菌RIMD2210633菌株在含有不同濃度MgCl2(0、3.5、35和55 mM)的心臟浸出液(HI)培養(yǎng)基中培養(yǎng)。將培養(yǎng)的OD600達到1.4的副溶血性弧菌以1：1000的稀釋倍數(shù)接種到含有不同MgCl2濃度的HI培養(yǎng)基中，然后分裝到96孔細胞培養(yǎng)板，每孔含有200μL菌懸液，每個濃度設置12個生物學重復。MGC-200每20分鐘自動檢測一次OD600值，以監(jiān)測細菌的生長情況。

實驗數(shù)據(jù)